食物和饲料中有毒草药的分析与控制

　　蔬菜食品和饲料可能自然含有毒吡咯里西啶生物碱(PA)。因此专家建议在加工前检查农用原材料和食品和饲料的PA污染情况。选择的方法是先前固相萃取(SPE)后的LC / MS分析。

　　在牧场和田野上，不仅健康的绿色生机勃勃，而且还有野生草本植物，这片土地和Pferdewirten都是眼中的刺。除其他外，他们遇到了所谓的雅各布剃刀，也称为雅各布的齿纹石，广泛存在于欧洲类似鲁科拉植物的温带地区。

　　然而，与火箭相比，雅各布的Greiskraut并不健康，相反。狗牙根和相关物种含有吡咯里西啶生物碱(PA)，这些生物碱由植物产生以防御掠食者。吡咯里西啶生物碱是天然毒素，已被证明具有肝损伤和一些遗传毒性致癌作用。即使少量PA的摄入也会导致逐渐中毒，这在马和牛中都可以观察到。PA中毒会导致严重的疾病，包括动物的死亡。

　　用Pyrrolizidinalkaloiden检测污染

　　令人担忧的是，Jacob的Greiskraut也出现在商业茶叶中，例如茴香，洋甘菊，草药，薄荷，荨麻和柠檬香蜂草茶，以及某些蜂蜜。在进行风险评估时，联邦风险评估研究所(BfR的)在柏林，在食物(草药茶，路易波士茶，红茶和绿茶和蜂蜜)的结论发生PA量均为长期(慢性)录制有害健康的儿童和成人。食品制造商BfR称，采取措施减轻食品添加剂的负担是任务。

　　有多大是必须掌握这里的挑战，以下考虑清楚：有PA生产超过6000种植物，这是全世界所有开花植物的三成以上，预计博士 来自食品法和食品科学联合会的Birgit Christall 。据BfR报道，目前已知有600多种不同的PA化合物及其N-氧化物，已在全球350多家工厂中检测到。怀疑全球PA工厂的广泛使用。吉特Christall考虑消费者的保护，2015年12月其在16日的BfR论坛演讲，有来自PA人类和动物的仔细观察没有百分之百的保护。

　　这个视图可以指示为什么它，而不是药物，迄今为止是用于饲料和食品功率放大器没有法定确定和限制，充其量建议和“食品法典委员会的“行为准则” 委员会Alimentarius“关于含PA植物的处理和释放和分配。欧洲食品安全局(EFSA)目前无法设定每日可容忍摄入量(TDI)。BfR基本上具有零容忍限制，但在特定情况下似乎不切实际。真正的座右铭，剂量使毒药，博士Birgit Christall保持食物和饲料中的PA水平尽可能低。

　　有效保护消费者免受吡咯里西啶生物碱的危害

　　农产品，包括食品和饲料关键PA存在的调查并不容易，BFR的意见写道：该PA分析点由于不同食物的大结构多样性和发生了特殊的挑战近年来，BfR制定了具体的检测方法并在合作试验中验证了它们。这些方法可用于国家和行业的食品和饲料监测。然而，目前只有有限数量的现有功率放大器可用作参考标准，因此BfR还另外开发了分析方法，以便能够估计总的PA含量。

　　BfR的建议对PA的植物材料中的判定根据通过固相萃取(SPE)的分析物的先前富集的LC-MS / MS方法[5]：的PA将使用超声波浴双重与硫酸盐水的植物材料中提取。随后，将样品离心并将等分的上清液用于使用C-18材料的固相提取(SPE)。在PA的甲醇洗脱后，将洗脱液蒸发至干，并将残余物溶于甲醇 - 水混合物(初始HPLC条件)。接下来是色谱分离和质谱检测。

　　专门从事食品和饲料分析的订单实验室依赖于高效的样品处理。“就在这里BfR的方法，即高人力和时间，特别是样品制备的主要缺点，”弗兰齐斯卡Chmelka，特拉，经认可的合格食品技术专家和主任，专门从事食品和环境样品合同实验室的分析说。为了提高分析的生产率，T​​ela已经自动化了BfR方法。

　　关注使用的分析技术

　　弗朗西丝Chmelka和同事在结合使用设备的组合对于由多用途取样器(的Gerstel-MPS)的PA分析，特别是用于自动SPE与来自Agilent Technologies(1290年代HPLC + 6495三重四极杆的LC-MS / MS系统)。分析物在标准RP-相(NUCLEODUR C18 HTEC 250×2毫米×5微米，马歇雷-Nagel的)的分离，使用的洗脱梯度的由5mM甲酸(洗脱液A)和甲醇(洗脱剂B)的：0分钟(5%B) - 3分钟(5%B) - 7分钟(20%B) - 13分钟(20%B) - 16分钟(65%B) - 17分钟(95%B) - 20.1分钟(5%B)。流速为0.25mL / min，柱温为28℃ 注射5μL洗脱液。在多反应监测(MRM，ESI阳性)中选择性检测分析物。

　　自动SPE是一个关键

　　Franziska Chmelka说：“我们在方法开发方面的重点是自动化最耗时和劳动力密集的工作步骤，即固相萃取(SPE)。经过所需的实验阶段后，Tela的应用专家确定了一种合适的C18-RP材料作为吸附剂(Macherey-Nagel C18 ec 3 mL / 500 mg)。所有SPE步骤均在方法开发过程中成功实现自动化：使用5 mL甲醇和5 mL水调节吸附剂，将5 mL样品加载到吸附剂上，并用5 mL甲醇洗脱分析物。“我们也成功了。Norbert Helle，管理合伙人和指定的LC / MS专家，“蒸发洗出液，

　　标准混合物的分析揭示了在各方面具有良好分辨信号的干净色谱图。Franziska Chmelka：“单个物质的良好分离和溶解是非常重要的，因为许多物质具有非常相似的质量转变，因此各种PA的区别仅在于保留时间。”

　　随后，Tela的应用专家通过分析真实样本，即Jacobs Greiskraut的叶子，将设备和方法的功能加入测试。这里已发现“说服我们的自动SPE-LC-MS / MS方法的优度的任何统计学相关的参数，说：”弗兰齐斯卡Chmelka和补充说：“线性极好在宽校准范围下降到1毫微克/毫升的所有道路。这同样适用于回收率，从分析物到分析物的回收率在85%到98%之间不等。该方法的重现性，包括样品制备和测量，显示出1.29和4.83百分比之间的分析物依赖性变化范围。特别重要的是保留时间是稳定的，仅在0.063和0之间，在几天的测量期间内有35%波动。测定范围在0.5到0.05μg/ kg之间是可以实现的。“

　　在另一个步骤中，他们询问有多少PAs实际通过茶叶进入。为此，他们添加了不同数量的圣雅各布草药甘菊茶，其比例为甘菊茶的10%，1%和0.1%。Franziska Chmelka谈到测量结果：“已经有0.1%的奖金足以证明茶叶中的PA。”

来源：实验与分析