美瑞泰克科技提供黄曲霉素解决方案

2018-06-05 15:15:55

黄曲霉素(Aflatoxins)

黄曲霉素存在于花生、棉籽粉、玉米、干辣椒粉等食品中。霉菌的生长并不一定表明黄曲毒素的存在，因为黄曲毒素只有在湿度、温度适合及通风良好才会生成。黄曲霉素B类具有蓝色荧光，G类具有绿色荧光。除了蔬菜中常见的(B1,B2,G1,G2)，还有存在喂食了有毒饲料的奶牛的牛奶中的黄曲霉素M，其中毒性最高的M的代谢物为4-羟基化的产物Bs.

1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为1类致癌物，是一种毒性极强的剧毒物质。黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用，严重时，可导致肝癌甚至死亡。在天然污染的食品中以黄曲霉毒素b1最为多见。其毒性和致癌性也最强。

1根据国标《GB/T 18979-2003》，使用柱后衍生方法可以在一次测定过程中，在同一荧光发射波长下同时检测出这六种黄曲霉素。(Pickering公司提供)

经过黄曲霉素免疫亲和柱净化，经过柱后后衍生荧光检测。

纯化回收率

基质	B1	B2	G1	G2
玉米（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb）	107%	91%	103%	75%
大米（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb）	107%	93%	98%	85%
麦芽（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb）	98%	99%	97%	70%
葡萄干（Alfa 10ppb，OTA 14.3ppb）	99%	106%	101%	69%

分析条件：

色谱柱：MYCOTOX柱，1612124。

温度：42℃

流速：1.0mL/min

流动相：MeOH,CH3CN,H2O; 22:22:56,

柱后衍生条件：

柱后衍生系统：Pinnacle PCX 1.4mL反应器

温度：95℃

试剂：I2 100mg/L 水溶液

检测：荧光检测，氙灯

激发波长：365nm 检测波长：430nm

仪器与耗材

货号	名称	品牌	规格
46300-U	黄曲霉素混合标准品	Supleco	溶于苯:乙腈(98:2) 1mL×5个
46323-U	黄曲霉素B1标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46324-U	黄曲霉素B2标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46325-U	黄曲霉素G1标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
46326-U	黄曲霉素G2标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
12058	黄曲霉素免疫亲和柱	Afla	AflaCLEAN 样品前处理柱分析黄曲霉素- 25 columns/box
1827-00110	玻璃纤维滤纸	Whatman	11cm孔径1.5um
80665	液相进样针	Hamilton	100ul
1153-1032	柱后衍生系统	Pickering	反应体积1.4mL
1612124	MYCOTOX反相柱	Pickering	C18，4.6×250 mm
18ECG001	保护柱夹套	Pickering	带3个保护柱

2. 根据国标《GB 5413.37—2010》食品安全国家标准乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定

(摘自Sigma-Alchrich 公司)

色谱柱：Ascentis Express C18, 2.7um, 2.1×100mm

柱压：230bar

流速：0.3ml/min

柱温：35℃

试液温度：20℃

进样量：10ul

流动相：A液，0.1%甲酸溶液; B液，乙腈-甲醇溶液(1+1)

时间(min)	流动相A%	流动相B%	梯度变化曲线
0	68.0	32.0
4.25	55.0	45.0	线性
5.00	0.0	100.0	线性
5.70	0.0	100.0	即时
6.00	68.0	32.0	线性

仪器与耗材

货号	名称	品牌	规格
46319-U	黄曲霉素M1标准品	Supleco	10ug/ml, 溶于乙腈
12058	黄曲霉素免疫亲和柱	Afla	AflaCLEAN 样品前处理柱分析黄曲霉素- 25 columns/box
53823-U	Ascentis Express C18	Supleco	2.7um, 2.1×100mm
AP-SE-12B	固相萃取装置	Ameritech	方形12孔
AVP-7120	真空系统	Ameritech	抽气速度:20L/min;真空度:200mbar
532122N	针式过滤器	Ameritech	水系微孔滤膜13mm 0.22um 200个

3 高效光化学反应法测定黄曲霉素B1（摘自LcTech）

此法检测成本低，可用等度HPLC直接测定

流动相：水/甲醇/乙腈:60/30/15 (v/v/v)
流速：1.2mL
进样量：100uL
色谱柱：RP C18
荧光检测：发射波长：365nm，接收波长：460nm

光化学衍生是一种简单、便宜、灵活的技术，可提高很多分析物质检测的灵敏度和选择性。黄曲霉素B1可在8分钟以内出峰，且检测信号明显增强

货号	名称	品牌	规格
46323-U	黄曲霉素B1标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)
12058	黄曲霉素免疫亲和柱	Afla	AflaCLEAN 样品前处理柱分析黄曲霉素- 25 columns/box
1100-3348	UVE 光化学反应器	Pickering	光化学反应器单元，240V
10522	黄曲霉毒素分析柱RP C18	Lctech	150×4.6mm
10523	RP C18保护柱芯	Lctech	3个/包
10750	保护柱套	Lctech	1个

4根据《 GBT 17480-2008 饲料中黄曲霉毒素B1的测定酶联免疫吸附法》

LCTech AflaREAD ELISA试剂盒能够定量检测黄曲霉素B1，即使是浓度很小的黄曲霉素B1，也能够定量检测。ELISA试剂盒能够快速、容易的从多种产品中分析出黄曲霉素B1，如坚果、杏仁、大米、玉米、香料或动物饲料。AflaREAD 的检测限非常低，为0.1 ppb.

货号	名称	品牌	规格
11139	AflaREAD ELISA试剂盒	LcTech	ELISA 96孔板，标准溶液1-8（0-5 ng/mL）检测溶液洗液呈色溶液终止液稀释缓冲液
46323-U	黄曲霉素B1标准品	Supleco	3ug/ml, 溶于苯:乙腈(98:2)