如何做好食品中脱氢乙酸的测定?

2018-05-25 13:08:30

　　脱氢乙酸作为一种新型的化学防腐剂，在食品分析检测中，对脱氢乙酸的测定几乎是必不可少的，尤其在食品安全问题备受关注的今天，对脱氢乙酸的准确测定更显得尤为重要，今天就和小析姐一起学学如何做好食品中脱氢乙酸的检测工作吧。

　　我们都知道一个检测项目的成功与否和多种因素是分不开，从采样、制样、到前处理最后上机检测，仪器的状况条件，环境的温度/湿度等等一些列的条件因素都将影响检测结果的准确度。

　　而前处理又是重中之中，小析姐也总结了一下有关实验室内提高回收率的前处理方法，快来看看和你的实验方法有多少区别吧。

　　1 确定提取溶剂

　　脱氢乙酸难溶于水，在弱碱性水溶液(pH 值7-8)中溶解度较大，易溶于乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂。分别选用乙醇、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、环己烷/ 乙酸乙酯(1:1，V/V)作为提取溶剂, 按GB/T5009.121-2003 中处理方法进行回收率试验，试验结果表明石油醚提取效率较差，而乙醇、乙醚、乙酸乙酯提取效率高且相差较小。

　　但对于憎水的弱极性气相色谱柱来说，用乙醇和乙醚提取很难除去水分，而且乙醚提取物中脂肪较多，很难处理干净;环己烷/ 乙酸乙酯比乙酸乙酯提取效率低一点，而且其提取共萃物也更多，因此GB 5009.121-2016中还是采用乙酸乙酯作为提取溶剂，在进GPC 前转换成环己烷/ 乙酸乙酯(1:1，V/V)溶剂。

　　2 选择萃取方式

　　在GB/T 5009.121-2003 中，样品前处理需加硫酸调节溶液成酸性，再用乙醚提取3 次，后用饱和氯化钠、碳酸氢钠溶液多次洗涤乙醚提取液。由于调节pH 使组分处于中性分子状态，提取后造成乙醚提取液中或多或少含有硫酸，酸性进样液会造成气相色谱柱中固定液的流失，甚至损坏色谱柱。而且乙醚提取液中含有脂肪成份较多，采用脱脂棉脱脂效果不理想，易将脂肪带入毛细柱，使毛细柱不易清除这些高沸点的杂质，从而造成污染。

　　而在GB/T 5009.121-2016中采用了新的提取方式依然不能有效的解决问题。故而引入加速溶剂萃取仪(ASE)，选择合适的溶剂、并增加溶剂的温度(40℃～200℃)和压力(1500psi～2000psi)来提高提取过程的效率，提高温度使溶剂溶解待测物的容量增加，提高溶质的溶解能力，从而提高提取效率及速度。就可在不必调节样品溶液酸度情况下，完全萃取目标物。实验结果表明了有机溶剂用量少、快速、回收率高的优点。

　　3 选择合适的净化方式

　　甜食样品经ASE 萃取，便有大量的脂类、色素、糖份等干扰物质被提取出来，这些高分子聚集在GC 的进样口和分析柱上，造成色谱分离效率降低。因此，这类样品必须进行有效的净化。

　　即使GB/T 5009.121-2016中加入了C18固相萃取柱进行净化，但净化效果依然不是很理想。但用凝胶渗透色谱(GPC)对样品进行净化分离时，油脂(通常分子量大于600)等大分子物质首先流出，随后是小分子物质(脱氢乙酸等)，而且淋洗溶剂的极性对分离的影响并不起决定作用，特别适合净化含脂和色素的样品。

　　而糖类由于流出时间与脱氢乙酸的接近，因此洗脱液还是含有部分糖类，由于存在糖类造成进样针进样时不易清洗易堵塞，因此提取液在进GPC 前用100mL10% 氯化钠溶液洗涤，可以达到清除糖类作用。此净化处理效果很好，同时对色谱柱也有很好保护。下图是未经过GPC净化和经过GPC净化的对比图。