食品基质中403种农药残留的测定

仪器和主要试剂

Agilent 1200 RRLC快速高分离度液相色谱；Agilent 6410 QQQ（三重串联四极杆质谱）；振荡仪；氮气吹干仪。
所有试剂均为色谱纯，购自Sigma公司；C18 SPE柱（Supelclean LC-18，3ml Tubes，Supelco）；微孔滤膜过滤：0.45μm（Supelco）；所有农药标准品购自Sigma Inc.。

标准溶液的制备

标准储备溶液：分别精确称取5.0mg分别置于10ml容量瓶中，根据标准物质的溶解度选甲醇、乙腈等溶剂溶解并定溶至刻度。
混合标准溶液（混合标准溶液A、B、C、D、E和F）：按照农药及相关化学品的性质和保留时间，将403种农药及相关化学品分成A、B、C、D、E、F六个组。

依据每种农药的分组，移取一定量的单个农药的标准储备液于100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，所有被分析物的线形浓度范围0.5~500ng/ml。混合标准溶液避光4℃保存，可使用一个月。

样品的提取与净化

称取10g样品至300ml三角瓶中，加入100ml乙腈并震摇30min，过滤乙腈提取液至100ml梨形瓶中，于40℃水浴浓缩至5ml左右。100ml 4%氯化钠水溶液分三次溶解浓缩液，并将其全部转移至分液漏斗中，加入50ml二氯甲烷震荡提取10min（重复二次）。下层有机相过装有无水硫酸钠的漏斗于100ml梨形瓶中，40℃水浴旋转浓缩蒸干后用5ml甲醇溶解，上C18 SPE柱（Supelclean LC-18，3ml Tubes，Supelco；SPE柱预先用5ml甲醇洗脱，然后用5ml洗脱进行预处理），用5ml甲醇洗脱，全部甲醇洗脱液在氮气下吹干，残留物用甲醇：水（15：85）定容至1ml，0.45μm微孔滤膜过滤后供LC-QQQ分析。

操作条件

色谱条件

谱柱：Agilent SB-C18，2.1×100mm，1.8μm；柱温：50℃；进样量：20μl；流动相及流速见表1；后运行时间：8min。

质谱条件

电离源模式：电喷雾离子化；电离源极性：正模式；雾化气：氮气；雾化气压力：40psi；离子喷雾电压：4000V；干燥气温度：350℃；干燥气流速：10L/min；分辨率：Q1（unit）Q3（unit）。

样品分析

定性测定：在相同实验条件下进行样品测定时，如果样品中检出色谱峰的保留时间与基质标准中某种农药及相关化学品色谱峰的保留时间一致，并且在扣除背景后所选择的二对离子及丰度比也一致，则可判定为样品中存在这种农药残留。

定量测定：本方法中LC-QQQ采用外标校准曲线法定量测定。为减少基质对定量测定的影响，定量用标准溶液采用基质混合标准工作溶液绘制，并且所测样品中农药残留的响应值均在线性范围内。

平行试验：按以上步骤对同一试样进行平行试验。

空白试验：除不称取试样外，均按上述步骤进行。

结果计算：LC-QQQ测定采用标准曲线法定量，标准曲线法定量结果由Mass Hunter定量软件Quantitative Analysis计算生成。

结果

403种农药的线形浓度范围0.5~500ng/ml，线形关系良好，R值均大于0.99。谷物样品中农药残留的总离子流图（TIC）见图1、图2。

结论

本文所建立的方法具有出色的检测灵敏度、良好的线性关系和重复性，非常适用于复杂食品基质中痕量农残的分离检测。Agilent快速高分离度液相色谱（RRLC）与三重串联四级杆质谱（QQQ）的联用，不仅显著改善了复杂样品的分离度、而且极大提高了检测灵敏度和分析通量。