GPC有效净化"毒"豇豆样品基质

近期，海南“毒豇豆”事件再一次引起了人们对食品安全的高度关注。此次事件，问题在于豇豆中残留的高毒农药水胺硫磷。本文使用凝胶净化(GPC)方法进行样品处理，除去大部分的干扰物质，无需再通过SPE小柱净化即可满足后续分析检测的要求。

本文由莱伯泰科有限公司提供。

图1. 水胺硫磷标样HPLC色谱图

水胺硫磷(isocarbophos)为一种速效广谱杀虫杀螨剂，又称作羧胺磷，在农业害虫防治方面担当着重要的角色。但各种资料中均明文规定不可以用于蔬菜。春节前，武汉查出3596.9公斤海南豇豆含禁用农药水胺硫磷，随即全部销毁。为防有毒豇豆再次流入， 5月6日前，海南豇豆将不能出现在武汉市场。而继武汉之后，合肥、杭州、广州均发现了问题豇豆。农业部已下发紧急通知，要求加强农产品生产环节的监管。

针对此次事件，莱伯泰科有限公司科研中心对高毒农药残留分析提出了解决方案。实验前处理主要参照NY/T761-2004 (蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留检测方法)及GB/T 5009.218-2008(水果和蔬菜中多种农药残留量的测定)方法，使用凝胶净化(GPC)方法除去大部分的干扰物质，将处理好的样品用HPLC进行检测。经过GPC净化后无需再通过SPE小柱净化即可满足后续分析检测要求。通过高中低三个浓度加标回收率实验测定，结果表明完全满足样品前处理实验要求。

图2. 豇豆样品（加标）HPLC色谱图

实验仪器

LabTech GPC Cleanup 800

LabTech HPLC 600

LabTech 旋转蒸发仪 EV311

实验条件

GPC净化条件

LabTech 高效不锈钢净化柱，20×300mm;填料，Bio-Beads S-X3 200-400目;流动相，乙酸乙酯∶环己烷=1∶1;流速：5.0 ml/min;检测波长：225nm;进样量：2 ml。

HPLC检测条件

流动相，ψ(CH3OH∶H2O)=60∶40;流速：1.0 ml/ min;检测波长：225 nm;进样体积：5μl。

结果与讨论

参照NY/T761-2004方法做样品前处理，谱图如图1、图2所示。

由上图可以看出，由于豇豆样品基体较复杂，采用NY/T761-2004做样品前处理，无法较好地去除基体干扰，目标物与其干扰物质无法完全分开。

参照GB/T 5009.218-2008方法，提取后添加凝胶净化步骤。将提取后的样品使用LabTech GPC Cleanup进行净化。

图3. GPC净化色谱图

由图3可以看出，豇豆样品萃取后的样品溶液有较大量的大分子成分，其含量远远高于水胺硫磷的含量，这也是采用NY/T761-2004标准进行样品前处理后，色谱图非常复杂的原因;由图4可以看出，经过GPC净化后的样品，其干扰物质已经基本去除，残留少量杂质不对检测产生干扰。故对于豇豆样品，经过GPC净化后无需再通过SPE小柱净化即可满足后续分析检测要求。通过高中低三个浓度加标回收率实验测定，结果如表1所示，满足样品前处理实验要求。

图4. GPC净化后HPLC色谱图

来源：实验与分析