UPLC-HRMS实现中药材质控

目前，我国对不同产地中药材有效成份的控制，以及对不同栽培方式、不同季节采收或不同加工炮制工艺后中药材的质量评价尚无统一方法。近年来，研究人员在中药质量标准研究方面积累了大量宝贵经验。如显微法、化学法用于药材检验；用药材中含量高的组分做为质量评价的标准；以药理学动物模型和药效学作为评价标准；将分子基因学手段用于中药材的检验等。但上述方法或缺少一定的科学依据，或耗时、成本高，或不够充分、客观，难以被中医药理论所接受。本文结合目前较先进的分离检测技术对中药材的质控提出了新的思路。

UPLC-HRMS实现中药材质控

考察中药的优良度，需尽可能地对重要成分定性定量。现代测定方法以薄层色谱法、气相色谱法和高效液相色谱法为主，但其对组分的定性能力不高，有时会出现错误判断。随着技术的不断更新，高分辨质谱（HRMS）在中药材质量控制的地位日益提升，尤其与超高效液相（UPLC）联用，可使样品的分析时间缩短、分离效率提高。同时还有适应性广、检测限低、进样量小、溶剂消耗少、自动化程度高、定性能力高等特点，在中药材质量标准化研究和中成药质量研究中发挥重大作用。

中药成分分析具有化合物组分复杂、极性差别大、结构多样等特点。UPLC分离度好、效率高、灵敏度佳还可节约大量溶剂，是中药复杂成份分析的利器，也是目前高端质谱的最佳接口。

HRMS用于中药组分定性

HRMS可以在最短时间内获取被检测化合物的精确质量和二级质谱分析数据。对化合物的精确质量可以精确到小数点后四位，质量偏差小于1ppm，结合同位素峰的强度配比与二级碎片的元素组成最终确定化合物的分子式。并同时满足高通量常规分析，充分满足了对复杂的中药组分进行定性的要求。

分析不同产地药材的成分差异

采用非数据依赖的采集模式（MSE），实现一针进样同时得到所有化合物的母离子和子离子信息和中性丢失扫描的结果，同时避免了含量低组分的信号丢失。采用二元比较功能，分别从色谱和光谱角度进一步排除不同产地药材的背景信号，进而得到差异组分的真实信号；利用Lynx或TransOmics等软件分析比较不同产地药材的化学成分差异。

图2显示了不同产地蝴蝶亚仙人掌的成分差异，距离近的点表示其化学成分的差异较小，距离远的点表示其化学成分的差异较大，可以清楚地分析出哪些产地的蝴蝶亚仙人掌成分类似，哪些差异较大。对于同一药材，不同季节收获或不同生产工艺、不同炮制方法得到的组分差异均可通过该软件分析。将差异进行S-Plot分析，对距离X,Y最远的标记物进行鉴定。如图中蓝色的点距离X,Y最远，说明该组分是造成不同药材差异的主要原因，对其进行结构鉴定，对后期的定量或标准的制定有重要意义。

标记物定量分析

对9.88min的标记物进行结构鉴定，可进行本地中药数据库搜索，要求数据库中涵盖该中药的相关信息，同时有该组分的质量、分子式、化学结构等相关物理参数；也可进行在线数据库搜索，Lynx中嵌合了Chemispider等在线数据库533个，可对标记物的相关信息搜库。对软件给出的结构进行确证，MassFragment可智能化地对软件给出的化学结构进行二级碎片数据的匹配，进一步确证结构鉴定的正确与否，最后对相关差异标记物进行定量分析。

小结

不同产地中药材质量的优劣，在于其中的化学成分在种类分布及含量高低上的差异，这种差异可从样品的色谱、高分辨质谱反映出来，最终做为标定不同药材间质量差异的特征。本文从样品化学成分的总体差异入手，反映样品质量的本质差异，还可用于同一产品不同生产厂家质控或不同生产工艺的质控的标准制订。