测定食品中的顺丁烯二酸与顺丁烯二酸酐总量

1. 适用范围： 本检验方法适用于顺丁烯二酸酐淀粉及其製品中顺丁烯二酸(maleic acid) 与顺丁烯二酸酐(maleic

anhydride)总量之检验。

2. 检验方法： 检体经萃取、皂化后，以高效液相层析仪(high performance liquid chromatograph, HPLC)分析之方法。

2.1. 装置：

2.1.1. 高效液相层析仪：

2.1.1.1. 检出器：光二极体阵列检出器(photodiode array detector) 。

2.1.1.2. 层析管：GL Sciences InertSustain C18，5 m，内径 4.6 mm × 25 cm，或同级品。

2.1.2. 振盪器(Shaker) 。

2.1.3. 酸硷度测定仪(pH meter) 。

2.2. 试药：甲醇採用液相层析级;磷酸(85%) 、盐酸及氢氧化钾均採用采试药特级;去离子水(比电阻于25C 可达18 MΩ.cm 以上) ;顺丁烯二酸对照用标准品。

2.3. 器具及材料：

2.3.1. 容量瓶：50 mL 及100 mL。

2.3.2.离心管：50 mL， PP材质。

2.3.3. 滤膜：孔径0.22 μm，PVDF 材质。

2.4. 试剂之调制：

2.4.1. 50% 甲醇溶液：取甲醇250 mL，加去離子水使成500 mL。

2.4.2. 5N盐酸溶液：

取去离子水50 mL ，徐徐加入盐酸42 mL ，混匀冷却后，再加去离子水使成100 mL。

2.4.3. 0.5N 氢氧化钾溶液：称取氢氧化钾14 g ，以去离子水溶解使成500 mL。

2.4.4. 0.1%磷酸溶液：

取磷酸1.2 mL ，加去離子水使成1000 mL 。

2.5. 移动相溶液之调製：

取0.1%磷酸溶液与甲醇以98：2 (v/v) 之比例混匀，经滤膜过滤，取滤液供作移动相溶液。

2.6. 标准溶液之配制：

取顺丁烯二酸对照用标准品约100 mg，精确称定，以去水溶解并定容至100 mL，作为标準塬液，冷藏储存。临用时精确量取适量标准原液，以去离子水稀释至0.02 ～1.0g/mL，供作标准溶液。

2.7. 检液之调制：

将检体均质或混匀后，取约1 g，精确称定，置于離心管中，加50% 甲醇溶液25 mL ，振盪30分鐘后，加0.5N 氢氧化钾溶液20 mL ，混匀，静置2 小时。加5N盐酸溶液约3 mL，使呈酸性，以去離子水定容至 50 mL 。静置后，取上清液 100 L (a) ，加去離子水使成1000  L (b)，混匀后，经滤膜过濾，供作检液。

2.8. 鉴别试验及含量测定：

精确量取检液及标準溶液各20 μ L，分别注入高效液相层析仪中，依下列条件进行液相层析，就检液与标準溶液所得波峰之滞留时间及吸收图谱比较鑑别之，并依下列计算式求出检体中顺丁烯二酸与顺丁烯二酸酐之总量(ppm)

( 注)：

检体中顺丁烯二酸与顺丁烯二酸酐之总量(ppm) =MF × V× C

C：由标準曲线求得顺丁烯二酸之浓度( g/mL)

V：检体定容之体积(mL)

M：取样分析检体之重量(g)

F ：稀释倍數，由b/a求得

注：顺丁烯二酸与顺丁烯二酸酐之总量，以顺丁烯二酸计。

高效液相层析测定条件(注)：

光二极体阵列检出器：波长214 nm。

层析管：GL Sciences InertSustain C18，5 m，内径 4.6 mm ×25 cm。

移动相溶液：依2.5.节调製之溶液。

移动相流速：1 mL/min 。

注：1. 所採用之层析管应有效将顺丁烯二酸与反丁烯二酸(fumaric acid)、醋酸、苹果酸(malic acid)及琥珀酸(succinic acid) 等分離。

2. 上述测定条件分析不适时，依所使用之仪器，设定适合之测定条件。

附注：食品中有影响检验结果之物质时，应自行探讨。

原文敬请查看：http://file.vogel.com.cn/2013/0619/0933075074.pdf

来源：实验与分析