GC/MS-SPE法检测纯油脂中邻苯二甲酸酯类化合物

2018-05-31 12:09:24

一、实验目的

以某食用植物油为样品，利用GC/MS和Cleanert PAE固相萃取柱建立对16种邻苯二甲酸酯类化合物的检测方法。

二、仪器及试剂

仪器：Agilent7890/5975 GC/MS;离心机;万分之一天平;涡旋混合器;超声仪;氮吹仪;

试剂： Cleanert PAE柱为天津博纳艾杰尔科技有限公司产品;16种邻苯二甲酸酯混标(1000ppm);乙腈(色谱纯);正己烷(色谱纯);乙酸乙酯(色谱纯);

三、实验过程

3.1 样品处理

用万分之一天平取0.1g食用植物油，置于玻璃样品瓶中，加入3mL乙腈，涡旋2min，超声2min，以4000r/m离心2min，将上清液转移至另一干净样品瓶中，于40℃氮气吹干，加入1mL正己烷，摇匀，作为待净化液。

SPE过程如下：

(1)活化：用5mL正己烷活化Cleanert PAE柱;

(2)上样：将待净化液全部上样;

(3)淋洗：10mL乙酸乙酯/正己烷(1:99，v/v);

(4)洗脱：5mL乙酸乙酯/正己烷(1:1，v/v);

将洗脱液于40℃下氮气吹干，加入1mL乙腈，涡旋混合1min，超声1min，4000r/m离心2min，取上清液进GC/MS测定。

3.2 标准曲线绘制

将16种邻苯二甲酸酯混标用正己烷稀释成20ppb、50ppb、100 ppb、200 ppb、500 ppb、1ppm、2ppm，用GC/MS进行测定，根据定量离子绘制标准曲线。所选定量离子及各个物质的标准曲线见附录1、附录3。

3.3 GC/MS条件

色谱柱：DA-5MS 30m*0.25mm*0.25μm

进样口：250℃，不分流进样

程序升温：50℃(1min)20℃/min 220℃(1min)5℃/min 280℃(4min)

进样量：1μL

流速：1 mL/min

接口温度：280℃

电离方式：EI

电离能量：70eV

溶剂延迟：7min

四、实验结果

4.1 谱图在上述色谱条件下，16种邻苯二甲酸酯类化合物的谱图如图1所示。

图1 16种邻苯二甲酸酯类化合物选择离子色谱图（500ppb）

出峰顺序依次为：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二 (4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 (DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)

4.2 加标回收率及精密度　　取5份食用油，在食用油中加入一定量的标准品，按照样品处理方法(3.1)做5份平行样品，回收率及方法精密度见表1。所得色谱图见附录2。表1 食用油中16种邻苯二甲酸酯类化合物的添加回收率及精密度

峰号	化合物	简称	保留时间	加标浓度100ppb		加标浓度500ppb
峰号	化合物	简称	保留时间	平均回收率	RSD(n=5)	平均回收率	RSD(n=5)
1	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	8.315	150.35%	15.19%	165.61%	3.72%
2	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	9.185	141.48%	15.09%	109.62%	2.99%
3	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	10.96	121.48%	8.11%	70.87%	6.94%
4	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	11.723	80.13%	15.75%	91.53%	25.75%
5	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	12.073	111.25%	10.09%	98.52%	5.55%
6	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	12.828	102.90%	8.50%	82.96%	3.85%
7	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	13.167	104.08%	7.08%	95.11%	3.73%
8	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	13.54	92.05%	6.62%	88.51%	4.17%
9	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	15.718	91.04%	5.48%	89.17%	4.95%
10	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	15.875	100.67%	5.69%	97.01%	5.20%
11	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	17.342	89.50%	5.72%	96.64%	5.34%
12	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	18.006	84.37%	6.96%	88.87%	5.52%
13	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	18.243	79.39%	5.31%	80.02%	8.67%
14	邻苯二甲酸二苯酯	—	18.393	70.02%	9.31%	66.12%	3.96%
15	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	20.669	79.56%	7.48%	82.41%	5.88%
16	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	23.24	77.41%	13.90%	74.98%	5.95%

说明：由于邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯是常见的增塑剂，在溶剂中会有些残留，容易在检测时造成它们的回收率和RSD不理想。建议计算时扣除溶剂空白。

附录1

表2 16种邻苯二甲酸酯类化合物定量离子及辅助定量离子

序号	保留时间/min	中文名称	英文缩写	定量离子	辅助定量离子
1	8.315	邻苯二甲酸二甲酯	DMP	163	77
2	9.185	邻苯二甲酸二乙酯	DEP	149	177
3	10.96	邻苯二甲酸二异丁酯	DIBP	149	223
4	11.723	邻苯二甲酸二丁酯	DBP	149	223
5	12.073	邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯	DMEP	59	149、193
6	12.828	邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯	BMPP	149	251
7	13.167	邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯	DEEP	45	72
8	13.54	邻苯二甲酸二戊酯	DPP	149	237
9	15.718	邻苯二甲酸二己酯	DHXP	149	104、76
10	15.875	邻苯二甲酸丁基苄基酯	BBP	149	91
11	17.342	邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯	DBEP	149	223
12	18.006	邻苯二甲酸二环己酯	DCHP	149	167
13	18.243	邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯	DEHP	149	167
14	18.393	邻苯二甲酸二苯酯	—	225	77
15	20.669	邻苯二甲酸二正辛酯	DNOP	149	279
16	23.24	邻苯二甲酸二壬酯	DNP	149	57、71

附录2

食用油样品加标色谱图

图2 食用油中加标色谱图（最后定容浓度为100ppb）

图3 食用油中加标色谱图（最后定容浓度为500ppb）

图2、图3中，样品出峰顺序依次为：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP)、邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯(BMPP)、邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)、邻苯二甲酸二戊酯(DPP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP)、邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)、邻苯二甲酸二苯酯、邻苯二甲酸二正辛酯(DNOP)、邻苯二甲酸二壬酯(DNP)

附录3

16种邻苯二甲酸酯类化合物的标准曲线（20ppb~2ppm）